【摘要】
．貓糖尿病是常見的內分泌疾病，發生率不斷上升。
．而且，貓和人類屬於極少數在胰島中形成澱粉樣蛋白沉積的物種。
．本研究的目的是建立一種從因為疾病而安樂死的貓的胰臟中分離胰島的方
案，並評估胰島素分泌對各種生理和藥理刺激的反應。
．組織學檢查顯示大多數非糖尿病貓和1隻糖尿病貓的胰臟活檢中存在胰
島澱粉樣蛋白。
．我們描述了從貓胰臟活檢中分離胰島的程序，並證明分離的貓胰島會分泌胰
島素以回應葡萄糖和抗糖尿病藥物。該研究為未來與了解貓糖尿病的病理生
理學和治療相關的胰島功能的離體研究奠定了基礎。
【1.介紹】
．貓科動物 DM 與人類 2 型 DM 相似，包括胰島素分泌受損、胰島素抗性和
胰島澱粉樣蛋白形成。
．透過針對高血糖的適當初始胰島素治療，內源性胰島素水平可能會恢復，許
多貓會進入緩解狀態，這被定義為獨立於胰島素治療。
．胰島素治療 1-6 個月後即可看到緩解，但開始治療後最快兩週即可實現胰島
素獨立。
．透過使用來自實驗動物和人類的分離的胰島進行的研究，對胰島生理學和
糖尿病病理生理學的主要見解已經得到了證實。但是人們對貓胰島的生
理學和病理生理學知道甚少。
．不建議給貓使用口服抗糖尿病藥物，但如果主人拒絕注射胰島素或考慮安樂
死，則被認為是一種臨時解決方案。
．本研究的目的是建立一個隔離方案利用動物的胰臟組織製作可存活的貓科胰
島因疾病而被安樂死，並評估胰島胰島素分泌對葡萄糖、K+、精胺酸、
glipizide和 exendin-4 的反應。
【2.材料與方法】
【2.1動物】
．兩隻貓因高血糖、代謝性酸中毒和高血酮而被診斷為糖尿病酮症酸中毒（DKA）。作為臨床檢查的一部分，對其中一隻貓的血清果糖胺進行了測量，結果發現果糖胺升高。在開始糖尿病治療之前，同一隻貓的血清胰島素低於檢測極限。兩隻貓都接受了 24-48 小時的恆速輸注短效胰島素治療，但最終因狀況惡化而被安樂死。
【2.2組織採樣】
此外，除一隻貓外，所有貓都進行了胰臟生檢，將其固定在 10% 中性緩衝福馬林中，用於組織學檢查。
【2.3胰島隔離】
．當膠原酶的消化過程中出現細沙狀的現象時，膠原蛋白酶的消化就停止了而
獲得混合物。
【2.4胰臟生檢的光學和螢光顯微評估】
．根據先前發布的方案，對切片進行輕度、中度或重度急性和慢性胰臟炎的分
級。
．澱粉樣變性的存在被分級為輕度（< 50%受影響的胰島）、中度（50–75%
的胰島受影響）或嚴重（> 75–100% 的胰島受影響）前面已經描述過。
【2.5胰島素分泌研究】
．培養的胰島以雙硫腙 (DTZ) 染色，DTZ是一種鋅結合染料，可使
含有 β 細胞的組織呈現微紅色。胰島免疫染色顯示胰島素大量陽性染
色的胰島細胞（棕色）。升糖素免疫染色顯示較少數量的強染色胰島
細胞（深色棕色）。胰島周圍有厚厚的外分泌胰臟組織邊緣。在 3 mM 葡萄
糖中孵育並改變時胰島素分泌。兩次加入新的 3 mM 葡萄糖緩衝液（p = 0.87
和 p = 0.46），證明分泌不受緩衝液剪切應力的影響交換（兩隻貓進行 1-2
批）。
【2.6胰島素酵素連結免疫吸附試驗】
．在分析之前，將分泌研究的上清液樣本解凍並在冷離心機中以 4500 g 離
心，以去除可能的細胞碎片。
【2.7統計數據】
．不同葡萄糖濃度培養的胰島的胰島素分泌對數轉換後以配對 t 檢定進行評
估。
【3.結果】
【3.1分離】
【3.2組織學檢查結果】
．12 隻貓中的一隻有輕微症狀的額外證據存在急性胰臟炎（慢性活動性胰
臟炎）。區域未檢測到壞死。
【3.3分離胰島的胰島素分泌】
．從兩隻患有糖尿病的貓身上分離出的胰島分泌胰島素對一隻貓進行了三批測
量，對另一隻貓進行了六批測量另一隻貓。在九批胰島中的八批中，無法注
射胰島素即使在高葡萄糖和 K+ 刺激後也能檢測到。這些胰島批次中的總胰
島素含量非常低（範圍 < 18–192 ng/L）與來自非糖尿病貓的批量胰島相比
（範圍3,600-367,600 奈克/公升）。剩下的一批胰島來自患有嚴重澱粉樣變性且
血清胰島素檢測不到的糖尿病貓，在 3 mM 葡萄糖下培養後可測量胰島素。
【4.討論】
．有趣的是，在來自一隻糖尿病貓的一批胰島中，血清胰島素濃度檢測不到，
exendin-4 引起了胰島素分泌。在低葡萄糖濃度和額外的影響，當細胞暴露於
高葡萄糖時會增加。這表明貓糖尿病酮酸中毒（DKA）通常表現為血液中胰
島素嚴重缺乏，但仍可能殘留一些胰島素分泌能力。
【5.結論】
．Exendin-4對胰島素分泌無顯著影響。在基礎條件下但增強葡萄糖觸發的胰島
素釋放，這表明與治療期間相比glipizide，治療期間發生低血糖的風險較低。
．本研究為未來胰島的研究奠定了基礎與了解貓糖尿病的病理生理學和治療相關的功能。
來源: https://doi.org/10.1016/j.domaniend.2023.106836